Inmovilización orientada de anticuerpos contra brucella spp en electrodos de oro modificados con tiourea

Resumen

Se realizó la inmovilización del bioreceptor inmunológico (anticuerpo específico contra Brucella spp) en la superficie del electrodo modificado mediante la formación de monocapas autoensambladas sobre la superficie de oro, con el fin de realizar la detección de Brucella spp en soluciones acuosas contaminadas in vitro. Para formar las monocapas orientadas y ordenadas sobre la superficie del metal, se planteó el uso de compuestos anfifílicos con átomos de azufre en uno de sus extremos y grupos aminos en el otro. Al unir los átomos de azufre a la superficie de oro, el extremo con los grupos aminos de la molécula anfifílica queda libre para fijar el fragmento constante (Fc) de los anticuerpos conformados por grupos carboxílicos. De esta forma, se planteó inmovilizar el elemento de reconocimiento mediante la preparación de monocapas autoensambladas de tioles sobre superficies de oro. Esta metodología permite exponer al medio ligandos con afinidad específica (anticuerpos) por un analito particular (antígeno), proporcionando una estructura molecular ordenada bidimensional que se obtiene tras la quimisorción oxidativa de tioles sobre superficies de oro, la cual permitió la inmovilización de los anticuerpos (Ac+) que interaccionaron con el antígeno. Los resultados obtenidos mediante voltametrías cíclicas (VC), mostraron que una vez establecidos algunos parámetros relacionados con la efectividad de la unión antígenoanticuerpo (pH, velocidad de barrido y tiempo de incubación del Ac+), se obtiene una mayor estabilidad en dicha unión.